*All tables, charts, graphs and pictures that are featured in this article can be found in the .pdf attachment at the end of the paper.
Úvod
Celosvetovo rozšírené rickettsiózy sú vektormi prenášané ochorenia, ktorých pôvodcom sú Rickettsie, obligátne intracelulárne baktérie. Rickettsie týfusovej skupiny R. typhi a R. prowazekii, pôvodca historicky známeho škvrnitého týfusu, sa prenášajú všami a blchami. Rickettsie zo skupiny purpurových horúčok (SFGR) sú prenášané najmä kliešťami. Vstupnou bránou je teda koža, odkiaľ sa rickettsie rozširujú krvným obehom a infikujú endotel, niekedy aj vaskulárny systém hladkého svalstva(1). Na Slovensku sú rickettsie prenášané najmä kliešťami Ixodes ricinus, Dermacentor reticulatus a D. marginatus (2). V r. 2011 bolo zriadené Národné referenčné centrum pre surveillance a laboratórnu diagnostiku rickettsióz pri Regionálnom úrade verejného zdravotníctva v Banskej Bystrici, ktorého hlavným poslaním je uskutočňovať sérologickú diagnostiku infekcií spôsobených rickettsiami a Coxiella burnetii.
Materiál a metódy
Séra pacientov sme obdržali z ambulancií ošetrujúcich lekárov po celom Slovensku. Na detekciu IgG protilátok v ELISA a IFA (pri šedej zóne ELISA) testoch sme použili antigén Rickettsia akari (RaAg, R) pripravený na našom oddelení a komerčné ELISA kity Spotted Fever Rickettsia IgG (Fuller Lab, F) a Rickettsia conorii ELISA IgG/IgM (Vircell, V). Informácie o pacientovi (pohlavie, vek, bydlisko, diagnóza, klinické príznaky a zaklieštenie) uvedené na žiadankách sme využili pre štatistické vyhodnotenie významností (p ≤ 0,05) v priamej súvislosti s výsledkami testov
(http://www.openepi.com/RbyC/RbyC.htm). Následne sme zhodnotili citlivosť a špecifickosť (https://www.medcalc. org/calc/diagnostic_test.php).
Výsledky
Prítomnosť IgG protilátok voči SFGR bola potvrdená oboma komerčnými ELISA kitmi v 9 prípadoch. RaAg poskytol pozitívny výsledok pri 10 sérach, z ktorých 8 bolo v zhode s komerčnými testami. Len 1 sérum nebolo rozpoznané ako pozitívne. Náš test naznačil šedú zónu, a preto pozitivita bola potvrdená až s IFA. Všetky tri testy vykázali zhodu aj v neprítomnosť protilátok pri 88 sérach. Výsledky sa líšili len v 12 prípadoch, kde jeden z testov naznačil pozitívny výsledok a pri 30-tich šedú zónu. Následne bola vypočítaná citlivosť (pre R 92,9 %, F 100% a V 78,6 %) a špecifickosť (pre R 76,8 %, F 95,2 % a V 98,4 %) jednotlivých testov. Séroprevalencia bola signifikantne vyššia u pacientov nad 41 rokov (11,9 %), žijúcich v meste (8,6 %; p = 0,041) a u pacientov s pozitívnou symptomatológiou pre rickettsiózy (12,3 %; p = 0,006). Rozdiely v séroprevalencii pre opačné pohlavia (žena: 43,7 %, muži: 59,7 %) neboli štatisticky významné (p = 0,364).
Diskusia
Všetkými použitými ELISA testami sme potvrdili prítomnosť IgG protilátok voči SFGR u 5,8 % pacientov zo Slovenska. Na Slovensku by mohlo ísť o infekcie spôsobené R. helvetica, R. monacensis, R. slovaca alebo R. raoultii. Na porovnanie v Taliansku bolo detegovaných približne 1000 prípadov infikovaných Rickettsia conorii(3) a v Portugalsku 9 prípadov ročne na 100,000 obyvateľov(4). V Belgicku, Švajčiarsku, či vo Francúzsku boli diagnostikované infekcie s R. conorii priemerne u 50 pacientov ročne na 100,000 obyvateľov(5).
Naše výsledky potvrdzujú cirkuláciu Rickettsia spp. na Slovensku. Poukazujú tým aj na skutočnosť, že diagnostike týchto infekčných ochorení je potrebné venovať pozornosť, a to najmä
v prípadoch, keď príznaky ochorenia naznačujú pôvod infekcie.
Záver
ELISA test na diagnostiku rickettsiových infekcií založený na antigéne R. akari vyvinutom na BMC SAV poskytuje zodpovedné výsledky, ktoré sú zhodné s komerčnými testami, a to najmä v prípade ak sa výsledky v šedej zóne potvrdia s IFA. Poďakovanie: Práca bola podporená projektmi APVV-19-0066 a Vega 2/0021/21.
Konflikt záujmov: Autori vyhlasujú, že nemajú žiadny konflikt záujmov.
LITERATÚRA
1. Masters EJ, Olson GS, Weiner SJ, et al. Rocky mountain spotted fever a clinician’s dilemma. Arch Intern Med 2003; 163: 769-774.
2. Špitalská E, Boldiš V, Košťanová Z, et al. Incidence of various tickborne microorganisms in rodents and ticks of central Slovakia. Acta virol 2008; 52: 175-179.
3. Raoult D, Lakos A, Fenollar F, et al. Spottless rickettsiosis caused by Rickettsia slovaca and associated with Dermacentor ticks. Clin Infect Dis 2002; 34: 1331-1336.
4. Oteo JA, Ibarra V, Blanco JR, et al. Epidemiological and clinical differences among Rickettsia slovaca rickettsiosis and other tick-borne diseases in Spain. Ann N Y Acad Sci 2003; 990: 355-356.
5. Komitova R, Lakos A, Aleksandrov A, et al. A case of tick-transmitted lymphadenopathy in Bulgaria associated with Rickettsia slovaca. Scand J Infect Dis 2003; 35: 213.
